A 2014-es évben a szelektív matriptáz inhibitorok hatékonyságának vizsgálata sertés bélhámsejteken témakörben 2 TDK hallgatóm ért el sikereket, mindkettőjükre nagyon büszke vagyok. Örülök, hogy tudományos munkájukat elősegíthettem, a kutatás iránti elkötelezettségüket tovább erősíthettem. Jövőre a kísérleti munkák folytatódnak, januárban a matriptáz enzim aktivitásának vizsgálatára kerül sor IPEC-J2 sejtekben fluorogén szintetikus peptidek segítségével. 

A szelektív matriptáz inhibitorok hatékonyságát a következő évben daganatos sejteken is kívánjuk tesztelni, számos sejtvonalon elemezzük majd a vegyületek potenciális citotoxikus hatását illetve a metasztázis kialakulásának késleltetésében betöltött szerepüket.  

Szeretném ezúton is megköszönni a kutatás támogatását és mindazok részvételét a projektben, akik nélkül ma nem lenne ismert, hogy a matriptáz enzimnek szerepe van a bélbarrier integritás fenntartásában sertés bélhámsejtek esetében, és hogy a bélhámréteg károsodásával járó kórképekben a matriptáz működésének helyreállításával lehetőség adódhat a bélgyulladás által előidézett tünetek mérséklésére.

Barna Réka Fanni a díjkiosztón veszi át oklevelét a matriptáz inhibitorok hatékonyságának sertés bélhámsejteken való tesztelését bemutató szóbeli előadását követően

Molnár Zsanett első helyezést ért el a bélbarrier integritás és a szerin-proteáz-aktivitás közötti összefüggést bemutató dolgozatával és szóbeli előadásával

Novemberben TDK hallgatóim kísérleti munkájuk eredményeit a Szent István Egyetem TDK Konferenciáján szóbeli előadásként mutatták be. Kutatásukban közös volt, hogy  a matriptáz/TMPRSS2 szerepét vizsgálták in vitro az enzimgátlók rövid, néhány órás  illetve több napig tartó alkalmazásával. Jövőre is szeretnék folytatni a matriptázzal kapcsolatos vizsgálataikat és hasznosítani az eredményeiket a későbbiekben a  szakdolgozat megírásánál. Molnár Zsanett a SZIE Gazdasági, Agrár és Egészségtudományi Kar Egészségtudományi szekciójában I. helyezést ért el és Dankó Miklós díjat kapott. Külön köszönet illeti Prof. Dr. Fodor Lajost a társtémavezetésért. Hallgatóim a kísérleti munka és a TDK dolgozat összeállítása során is lelkesek és motiváltak maradtak, és véleményüket így foglalták össze:

„TDK munkám során először dolgozhattam egyre többet szinte önállóan a laborban. Témám a szelektív matriptáz inhibitorok paracelluláris transzportvizsgálata volt, ennek kapcsán végeztem a kísérleteket. Elsajátítottam az immunfloureszcens festési technikát, végeztem FD4 átjutás vizsgálatot és TER mérést membrán inzerten tenyésztett IPEC-J2 sejteken. Kipróbálhattam az Amplex Red festéken alapuló hidrogén-peroxid mérést is, mindezeknek a kísérlettervezésében, és az adatok statisztikai kielemzésében aktívan részt vettem.” (Barna Réka Fanni, TDK hallgató).

"Nagyon örülök, hogy lehetőségem nyílt egy ilyen sokrétű kutatásban részt venni. Rengeteg időt és fáradtságot vett igénybe, de sikerült megismernem az oxidatív stressz jelentőségét, és különböző kísérleteket végezhettem a paracelluláris permeábilitás és a szerin-proteáz aktivitás szerepének meghatározására IPEC-J2 sejteken. Végeredményként pedig témavezetőim segítségével egy remek TDK dolgozatot írhattam meg." (Molnár Zsanett, TDK hallgató).

A Magyar Toxikológusok Társasága által szervezett TOX2014 konferencia Visegrádon a Thermal Hotelben, a Lepence-völgyben, a Pilisi Parkerdő szomszédságában került megrendezésre. A 3 napos rendezvény első napján a Biztonságfarmakológia szekcióban szóbeli előadást tartottam „Bélgyulladások vizsgálata és kezelési lehetőségei IPEC-J2 modellrendszerben” címmel. A hazai toxikológus szakemberek legnagyobb szakmai fóruma számos szekcióból állt: az Igazságügyi toxikológia, az Endokrin diszruptorok, Környezet Toxikológia és a Minőségbiztosítás szekciókban számos előadás hangzott el a toxikológia aktuális területeiről. Külön ki szeretném emelni, hogy a kiváló szervezés mellett a konferencián számos lehetőség adódott már korábban is együttműködések kialakítására, amelyek keretében a CYPtest diagnosztikai rendszer bevezetésre kerülhetett a hazai gyakorlatba hozzájárulva ezzel a személyre szabott gyógyszeres kezelések alkalmazásához a magyar kórházakban és klinikákon.

2014. novemberben a Szent István Egyetemen megrendezésre kerülő TDK Konferenciára több diákkörös hallgatóm is jelentkezik. Gőzerővel folynak a befejező kísérletek, melyek között szerepel a matriptáz/TMPRSS2 inhibitorok Amplex red módszeren alapuló hidrogén peroxid indukáló képességének mérése és a tight junction fehérjék közül az occludin lokalizációjának meghatározása. Molnár Zsanett tudományos diákköri munkáját egyrészt irodalmazással tölti (témakörök: a bélrendszer megbetegedése, bélgyulladások farmakológiája), másrészt gyakorlati munkájának részeként TMPRSS2 kimutatást végez kontroll és inhibitorokkal kezelt IPEC-J2 sejtek esetében.

A poszterszekcióban Kiss Ádám, Kiss Bátai-Konczos Attila és Kovács Ida társaságában a TOX 2014 konferencián

2014. augusztusban jelent meg az első nemzetközi publikáció egy II-es típusú transzmembrán szerin proteáz megoszlásának tanulmányozásából IPEC-J2 sejtekben, „Changes in the Distribution of Type II Transmembrane Serine Protease, TMPRSS2 and in Paracellular Permeability in IPECJ2 Cells Exposed to Oxidative Stress” címmel az Inflammation folyóiratban. Az általunk alkalmazott sertés bélhámsejtek által létrehozott réteg áteresztését vizsgáltuk transzepitheliális elektromos ellenállás és fluoreszcein-izotiocianáttal jelölt dextrán molekula átjutás méréssel. In vitro eredményekkel alátámasztottuk, hogy oxidatív stressz hatására, hidrogén-peroxid kezelést követően a bélbarrier integritás károsodik a kezelést nem kapott IPEC-J2 sejtréteghez képest. A fiziológiástól eltérő paracelluláris transzportfolyamatok mellett egy szerin proteáz, a TMPRSS2 lokalizációja is megváltozik, melyet immunfluoreszcens festési technikával követtünk nyomon. Megállapítottuk, hogy a TMPRSS2 módosult megoszlási mintázata és a hozzá köthető szerin proteáz aktivitás megváltozása hozzájárulhat az epithel barrier rezisztencia csökkenéséhez oxidatív stressznek kitett IPEC-J2 bélhámsejtréteg esetén. 

A kontroll IPEC-J2 bélhámsejtekben a sejtmagok kék, a TMPRSS2 piros, és a sejtmembránt jelölő WGA zöld színnel látható.